MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:
MTT比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色Formazan并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高;細胞毒性越大,則吸光度越低。
產(chǎn)品組成:
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使用說明:
1.收集對數(shù)期細胞,調(diào)整細胞懸液濃度,分于96孔板,每孔180μL,3000-10000個細胞/孔。
2.置37℃、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁,培養(yǎng)6-24小時。
3.加入適當濃度的受試化合物,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清,加入90μL新鮮培養(yǎng)液,再加入10μL MTT溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。
5.然后吸掉上清,每孔加入110μL Formazan溶解液,置搖床上低速振蕩10 min,使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。
6.同時設置調(diào)零孔(培養(yǎng)基、MTT、 Formazan溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的**溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT、 Formazan溶解液),每組設定3復孔。
注意事項:
1.由于使用96孔板進行檢測,如果細胞培養(yǎng)時間較長,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,由于96孔板周圍一圈*容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。
2.MTT溶液為黃色需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個月有效。
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